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丙酮酸激酶和1-磷酸果糖激酶突變可使谷氨酸棒桿菌吃糖更快

時(shí)間:2017-12-20     來源:生物催化劑設(shè)計(jì)與改造服務(wù)

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2017121日,德國尤里希研究所對谷氨酸棒桿菌模式菌ATCC 13032及其不含原噬菌體的變體MB001在葡萄糖基本培養(yǎng)基連續(xù)傳代進(jìn)行適應(yīng)性馴化。馴化100代后觀察到兩種菌株的生長速率均有20%的迅速提升,最終分別獲得的進(jìn)化株UBwUBm在葡萄糖基本培養(yǎng)基上的生長速率提高約26%。

對多株進(jìn)化菌的基因組重測序發(fā)現(xiàn)丙酮酸激酶pyk、1-磷酸果糖激酶fruK和鎂離子Mg2+內(nèi)運(yùn)蛋白corA關(guān)鍵突變位點(diǎn)。在馴化出發(fā)菌株中對pykfruK突變重構(gòu),不僅使葡萄糖消耗速率,也發(fā)現(xiàn)谷氨酸棒桿菌中主要負(fù)責(zé)葡萄糖攝取的磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)的酶II編碼基因 ptsG的表達(dá)增加,導(dǎo)致菌株在葡萄糖基本培養(yǎng)基上生長加快。而corA突變株僅在鎂離子限制條件下對生長速率提升有作用,可能是在馴化中某個(gè)時(shí)期鎂離子缺乏意外導(dǎo)致的該突變。

這項(xiàng)研究的結(jié)果有助于獲得更好的谷氨酸棒桿菌工業(yè)菌株。題為“Adaptive laboratory evolution of Corynebacterium glutamicum towards higher growth rates on glucose minimal medium”。